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ip和input区别,ip的一抗和二抗和wb

IP与Input在RIP测序中的意义 2023-09-01 00:25 719 墨鱼
IP与Input在RIP测序中的意义

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阳性对照:确认细胞裂解物中确实存在目标蛋白(IP)或相互作用蛋白对(co-IP,如诱饵蛋白X和目标蛋白Y),通常称为输入。 提取的蛋白质溶液可直接用于Western分析。 阴性对照:用于排除假阳性。 经过IP/co-IP后,输入的目标蛋白是片段化的RNA,需要与沉淀的样品RNA一起进行反向交联、RNA纯化,最后通过PCR或其他方法进行检测。 通过后续的数据分析,我们可以通过输入控制消除背景噪声(非特异性结合引起的假阳性峰值),并进行验证

IP下的DNA对于INPUT的DNA来说肯定是非常小的,IP/Input的比例反映了目标蛋白结合的DNA量。这两者的DCo-IP:利用抗原抗体反应的特异性;GST下拉:一般是指使用带有GST标签的组合蛋白,与目标蛋白一起孵育,最后利用GST结合珠停止下拉相互作用复合物。 3.免疫共沉淀中的输入是什么意思?

⊙^⊙ 输入是指总蛋白,为阳性对照,IP是用相应的抗体沉淀相应的蛋白,IB是指相互作用信号。 5.Co-IP实验对抗体有什么要求? 如果是自身蛋白抗体,则该抗体需要达到IP水平,并且需要测试其效力。商业投入是阳性对照。 免疫共沉淀实验中,直接将细胞液进行WB,以验证细胞液中确实存在目的蛋白,即阳性对照。 如何避免重链和轻链的影响(点击此链接查看详情)?设计合适的IP实验;

首先,输入可以帮助检测超声处理的效果和样品中目标蛋白的表达。 其次,输入可以帮助判断ChIP的结果。通过将输入与IP(抗体免疫沉淀获得的目标蛋白)进行比较,可以通过后续的数据分析来判断是否获得ChIP。我们可以使用输入控制来排除背景噪音(排除背景表达水平较高或非特异性结合引起的一些假阳性峰),验证整个实验过程中染色质断裂的影响和IP的影响

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