coip实验流程煮脱,内源性coip和外源性coip

coip实验流程煮脱,内源性coip和外源性coip

＋﹏＋ 实验粗略流程：细胞裂解：获得总蛋白溶液细胞液与抗体孵育：蛋白-抗体复合物磁珠和蛋白-抗体复合物孵育：蛋白-抗体-磁珠复合物洗涤：洗涤去除非特异性结合蛋白关闭：结合蛋白-抗体复合物免疫共沉淀实验流程首页Co-IP实验流程1.实验原理原理免疫沉淀实验的实验原理如下图所示。首先，编码诱饵蛋白及其对应的配体——目标蛋白。 将质粒转染细胞，然后用去垢剂裂解细胞，得到

3.实验流程1：1.转染后24-48小时收获细胞，加入适量RIPA细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），裂解30分钟，4℃Cat最高转速离心30分钟。 1min后，取上清；2.取少量裂解液进行制备。第一张凝胶显示使用抗FLAG沉淀FLAG标签，发现两条带均具有130kd的蛋白质，表明两组实验中都存在EDR1-FLAG。 蛋白质大小为130kd，第二个凝胶图像使用抗GFP标记来沉淀G

①取约20ul细胞裂解上清，加入2倍上样缓冲液，煮5分钟作为输入组。提前一晚，接种量必须满足相应转染试剂的要求；（2）使用各实验室相应的转染试剂，用以下质粒转染2皿细胞：flagempty+HA

15.将上样的样品煮沸5分钟，去除游离抗原、抗体和微珠。离心上清液进行电泳，收集剩余的琼脂糖微珠。上清液也可以暂时冷冻在-20°C以供以后电泳。电泳前应再次煮沸。 5分钟变性。 微信II实验设备鉴别方法/步骤11.试剂准备1.预冷的PBS、RIPA缓冲液、细胞刮刀（包塑料包埋冰下）、离心机。 2.用预冷的PBS清洗细胞两次，最后一次吸干PBS。 3.加入预-