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lgg作为阴性对照 |
IP实验为什么要IgG做对照,免疫共沉淀为什么设计IgG
CO-IPisaco-免疫沉淀实验。 阴性对照的目的是排除非特异性免疫反应。 如果阴性对照呈阳性,则说明存在干扰,即非特异性免疫反应。 如果阴性,可以作为结果参考。IgG可以作为对照,或者共转后可以用空载体质粒作为对照。目前普遍认为IgG作为对照,准确度高,操作方便。
从手头的书籍和文献中,我不明白为什么在IP实验中使用IgG作为阴性对照。 IP的方法是,如果检测BandA是否有相互结合,那么固定细胞后,裂解细胞,离心提取蛋白,加入抗AIP就不用解释了,就是用目标蛋白对应的抗体进行抗体-抗原免疫反应,最后富集与目标蛋白相互作用的DNA,然后纯化建库,即为整个ChIP实验的核心——免疫共沉淀实验。 IgG有何用途? 我
缩短曝光时间,防止轻链和重链(杂条带)的干扰;3.阴性对照IgG和IP一抗添加过多:对照IgG抗体用量较多,容易导致杂条带的形成,建议将阴性对照IgG用量调整至1ug以下。 此步骤的关键因素是选择适当的阴性对照。 一般情况下,添加等量的IgG,但更合适的方法是针对细胞中其他不相关的靶蛋白选择一抗作为对照。 例如,对于膜蛋白A的免疫沉淀,选择膜蛋白
>^< 利用内源性Co-IP实验来验证两种蛋白质之间是否存在已知的相互作用,如果最终结果为阳性,则可以证明两种蛋白质之间存在相互作用;但如果结果为阴性,则不能证明两种蛋白质之间存在相互作用。 他们之间没有互动,而且有图尔认证的医疗行业从业者,这个问题解决了吗? 我也遇到了同样的问题,求教2018-08-27IP河南河南
说明所用抗体可用于IP实验,但抗体特异性较差,除了目标蛋白外,还会识别其他非目标蛋白。 与实验组完全相同。 简单来说,它作为我们的IP捕获抗体来完成整个IP实验过程。在后续的WB检测中,它的IP产物
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标签: 免疫共沉淀为什么设计IgG
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