coip为什么有重链轻链,IP实验消除重轻链的影响

coip为什么有重链轻链,IP实验消除重轻链的影响

如果可能，捕获的抗体应该是没有恒定区域的纳米抗体。 受限于财力和市场供给，上述两种方案都不太容易实现。 然而，如果您要做标记蛋白的IP，我们提供的解决方案可以完美避免这个问题。因此，除了在WB显色反应中检测目标蛋白外，如果使用的二抗与免疫沉淀实验中使用的抗体不同，如果分子属于同一种类，也可以检测重链和轻链分子。 免疫沉淀通常使用的抗体量很大（1ug）

ˇ△ˇ 首先，HC和LC带都非常明显。出现这种情况是因为在WB之前的蛋白质变性步骤中，由于上样缓冲液中含有巯基乙醇，巯基乙醇会使抗体的重链和轻链变性。 链间的二硫键被破坏，从而引起抗体反应：以兔IgG作为对照；使用抗FabandF抗体特异性阻断轻链和重链；从WB二抗开始，其针对的是轻链和重链之间的二硫键。如果您使用SDS凝胶，则在最终的开发中将无法检测到重链和轻链。 免疫共沉淀中未检测到与目标蛋白相互作用

为什么COIPIgG组有条带？可能你的目标条带靠近轻链或重链，所以IgG对照组也有条带；这是正常的，例如A蛋白较大，双蛋白相对较小，容易降解。 比如，A有可能钓出B，但反之则不然；IP中添加的A蛋白抗体和IgG抗体是验证蛋白质间相互作用的经典方法，但有一定的敏感性，对于一些较弱的相互作用或由于蛋白质表达水平太低而无法检测到的，则属于正常类别。 3.Co-IP实验中未检测到与目标蛋白的相互作用

免疫共沉淀（CoIP）作者38有点接近25，选择针对Fc的二抗。 如果是过表达后免疫共沉淀，直接选择纳米抗体。重链和轻链完全没有干扰，普通二抗就可以。02-28芦苇。在coip实验的最后一部分，在烹饪过程中，IP抗体会断裂为重链+轻链。 在SDS-PAGE电泳过程中，重链、轻链和ProteinA一起出现！ 2.三带是怎样形成的？ 当IP抗体和WB抗体使用相同的、或相同的来源（如兔）时。 由于SDS-P

2.哪有那么简单呢？上面解释了原理和流程，看起来很容易理解。 但研究并不等于理论。 在做CoIP实验的过程中，我们经常会遇到目标蛋白和抗体轻链（约25kDa）或抗体重链（约55kDa）的分子量。当检测抗体和捕获抗体来自同一物种时，二抗会识别捕获抗体的重链。 链状轻链分子，造成55kDa重链带和20~25kDa轻链带的干扰。 那么，如何避免这些杂信号的影响呢？ 常用方法有：(1