ip抗体用量,coip目的条带拉不出来

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1.首先，我想问一下，CO-IP通常需要的蛋白质总量是多少？ 我通常使用两个六孔板进行一次性转注，约500ug蛋白质。 这够了吗？ 2.关于抗体和抗体剂量的问题。 我想问一下，既然抗体是已知的，她总共有大约200片样品需要染色，每个样品都是按照1cm2的大小来计算的。 根据实验中的经验用量，每个样品需要500μl。 那么抗体稀释液需要：200个样品*500μl/样品=10000

IP实验步骤。小心地将上清转移到另一个试管中。增加蛋白A的浓度。彻底去除沉淀的非特异性抗体三免疫复合物。1.将预处理的蛋白溶液放入适当数量的15ml试管中。05ml将1ul抗血清加入试管中作为起始量来滴定抗体的量1.IP需要大量的细胞s，尤其是内源性细胞。一般来说，我会准备10厘米左右的细胞。 如果293是体外转染，也可以使用六孔板的一个孔；对于瞬时转染，转染后48小时收集细胞并丢弃培养基。

50个ulbead对应一个反应，推荐反应100个ully上清液（100ulRIP裂解缓冲液中加入2×107个细胞得到），因此只需在裂解前计数，并按照括号中的比例添加裂解缓冲液（1）免疫沉淀（IP）：利用抗原的特异性反应纯化和富集特定蛋白质的方法其主要过程包括捕获和固定化。 2）免疫共沉淀（CoIP）：CoIP在IP中进行

抗体可用于多种实验，包括WB（蛋白质印迹）、ICC（免疫细胞化学）、IHC（免疫组织化学）、IP（免疫沉淀）、ELISA（酶联免疫吸附剂）等，以检测、分离或可视化相应的抗原。 大多数情况下，抗原效率很高：抗体结合能力高，蛋白质非特异性吸附率低，节省抗体消耗。 如图所示，万能免疫（共）沉淀（IP/Co-IP）工具箱的组件设计巧妙，可见：欢迎"银粉"多多关注Abbkine官方账号。

下表显示了推荐的流行IP/CoIP抗体3.固体支持物（琼脂糖珠或磁珠）由于IP技术是作为柱亲和层析的改进方法而开发的，因此最初用于微量离心管，使用少量（10–25µL）琼脂糖树脂完成。 琼脂糖有不同的形式。1.IP/Co-IP重链和轻链干扰是如何产生的？ IP实验分为两部分（免疫沉淀IP+WB）。 免疫沉淀部分：在含有ProteinA的细胞液中加入ProteinA抗体（IP抗体），然后加入琼脂糖珠/磁珠形成