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coip蛋白互作顺序 |
coip抗体需要不同种属吗,ACC抗体
然而,目前COIP抗体品种存在一个问题,即不同COIP抗体的来源、生产工艺和性能特点可能不同,导致实际应用中效果不同。 首先,COIP抗体来源的差异可能会影响其物种问题。 目前,最好选择两个不同来源的抗体。 选择同一来源抗体的问题在于,在WB之前的蛋白质变性步骤中,由于上样缓冲液中含有巯基乙醇,巯基乙醇会破坏抗体重链和轻链之间的二硫键,从而使抗体
目前,ProteinA或Gis预固化在琼脂糖或磁珠上。ProteinA或G可以与多种抗体结合,用途广泛。当然,它们对不同物种抗体的亲和力是不同的。例如,ProteinA与兔子结合。 a.选择不同物种的抗体分别进行免疫沉淀实验和WB实验,然后选择物种交叉反应较弱或无物种交叉反应的二抗进行WB实验,可以大大削弱重链和轻链分子的WB信号。 b.使用
ProteinA和ProteinG的亲和力比较ProteinA和ProteinG对不同物种、不同亚型抗体的结合能力差异如下表所示。 在Co-IP实验中,抗体需要识别蛋白质的构象表位,而只能识别线性表位的抗体可能无法沉淀目标蛋白质,因此并非所有抗体都可以用于Co-IP实验。 另外,IP目标蛋白所用的抗体与Weat所用的抗体相同。
所提供的质粒需要进行测序验证,并提供峰图,防止碱基突变,延迟实验周期;3.基因序列客户提供基因序列,金科生物完成诱饵蛋白或目标蛋白的表达;4.检测抗体免疫检测≥20ul,在Co-IP实验中,抗体需要存储识别构象表位由于蛋白质的结构不同,只能识别线性表位的抗体可能无法沉淀目标蛋白质,因此并非所有抗体都可以用于Co-IP实验。 另外,IP目标蛋白使用的抗体与WeathernBL使用的抗体相同
(2)不能使用高浓度变性剂(0.2%SDS),细胞裂解液中应添加各种酶抑制剂。2.免疫沉淀抗体的选择3.抗体的使用对照抗体:阴性和阳性)阴性:单克隆抗体:IgG兔同种多克隆抗体:阳性(3)实验结果:输入测试图、IB测试图、测试染料、原片及报告;注意事项:1.细胞体积必须符合要求; 2.抗体必须是IP级抗体。对于COIP,两种抗体必须来自不同物种;3.关于实验设计,请提前咨询。 台北
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